闡明中藥復(fù)方藥效物質(zhì)及作用機(jī)制對揭示中藥配伍機(jī)制、完成中藥大品種改造、實現(xiàn)中藥現(xiàn)代化并獲得國際認(rèn)可具有重要作用，研究方法主要包括:血清藥物化學(xué)、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)、譜效關(guān)系、高通量篩選、代謝組學(xué)等。通過查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)對主要研究方法進(jìn)行綜述，為闡明中藥復(fù)方的藥效物質(zhì)及作用機(jī)制提供參考。

中藥在臨床應(yīng)用中常以中醫(yī)的辨證論治為基礎(chǔ)，以單味藥成方或按中藥的四氣五味、君臣佐使等特性組成中藥復(fù)方發(fā)揮最佳藥效，但其藥效物質(zhì)及作用機(jī)制無法科學(xué)、全面地闡明，極大限制了中藥的現(xiàn)代化、臨床應(yīng)用和國際推廣。傳統(tǒng)的中藥藥效物質(zhì)研究往往采取“化學(xué)成分分離-分子結(jié)構(gòu)鑒定-生物活性評價或活性導(dǎo)向分離”的模式，該模式是中藥藥效物質(zhì)研究的重要方法之一，引導(dǎo)了青蒿素的發(fā)現(xiàn)，但傳統(tǒng)研究模式忽視了中醫(yī)藥整體觀和系統(tǒng)論的特點。隨著近年來研究理論和技術(shù)的不斷革新，羅國安等根據(jù)中醫(yī)藥“方病對應(yīng)、證病結(jié)合、方-病-證整合”的特點，提出構(gòu)建“方-病-證整合”研究路線。隨之，以中醫(yī)藥整體調(diào)節(jié)、辯證論治等特點為導(dǎo)向的血清藥物化學(xué)、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)、譜效關(guān)系、代謝組學(xué)等技術(shù)體系成為研究的主流。筆者現(xiàn)對近幾年的研究理論和方法進(jìn)行綜述，為中藥復(fù)方藥效物質(zhì)及作用機(jī)制的研究提供依據(jù)。

1中藥復(fù)方藥效物質(zhì)及作用機(jī)制研究思路

當(dāng)前，中藥的藥效物質(zhì)研究主要有兩個方向，一是以中藥活性單體為導(dǎo)向，根據(jù)西藥的研究理論，從植物中分離提取出化學(xué)結(jié)構(gòu)確切、作用機(jī)制明確的成分進(jìn)行研究，如從植物罌粟中提取出的嗎啡、從古柯樹葉提取出的可卡因、從紅豆杉提取出的紫杉醇、從喜樹提取出的喜樹堿以及從青蒿提取出的青蒿素等;另一種則是以中藥復(fù)方為導(dǎo)向，在中醫(yī)整體觀、系統(tǒng)論的指導(dǎo)下尋找藥效物質(zhì)、闡明作用機(jī)制，是目前的主流研究方向。

針對中藥復(fù)方藥效物質(zhì)的研究，1997年羅國安等首先提出中藥有效部分理論，應(yīng)用現(xiàn)代分離技術(shù)提取有效組分，并利用指紋圖譜和指標(biāo)成分對中藥進(jìn)行定性、定量，將有效部分和藥效學(xué)研究相結(jié)合對中藥復(fù)方復(fù)雜體系進(jìn)行探索。21世紀(jì)初，以“組學(xué)”技術(shù)為基礎(chǔ)的系統(tǒng)生物學(xué)的出現(xiàn)和化學(xué)物質(zhì)組學(xué)理論的提出，中醫(yī)藥整體系統(tǒng)生物學(xué)理論孕育而生，通過化學(xué)物質(zhì)組學(xué)對中藥復(fù)方藥物系統(tǒng)進(jìn)行表征，利用基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)及藥理學(xué)等對機(jī)體生物系統(tǒng)進(jìn)行表征，建立“系統(tǒng)-系統(tǒng)”(system to system，S2S)模式闡明中藥復(fù)方(藥物系統(tǒng))與機(jī)體(生物系統(tǒng))的相互作用。隨后為解決研究過程中“方-病-證割裂”的現(xiàn)象，將整合生物標(biāo)志物體系納入S2S研究模式，構(gòu)建“方-病-證整合”研究路線，體現(xiàn)中醫(yī)藥“方病對應(yīng)、證病結(jié)合、方-病-證整合”的特點。此外，“組分中藥學(xué)”假說、中藥“藥效團(tuán)藥性”假說、中藥血清藥物化學(xué)理論、中藥藥效物質(zhì)的“顯效形式”新概念及“疊加作用”新假說等理論的提出，為中藥復(fù)方藥效物質(zhì)及作用機(jī)制的研究提供思路。

2中藥復(fù)方藥效物質(zhì)及作用機(jī)制研究現(xiàn)狀

隨著研究中藥復(fù)方藥效物質(zhì)及作用機(jī)制新理論、新思路的不斷提出，血清藥物化學(xué)、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)、高通量篩選技術(shù)、代謝組學(xué)、譜效關(guān)系等研究技術(shù)與方法也不斷涌現(xiàn)，研究方法見表1。

2.1基于血清藥物化學(xué)的中藥復(fù)方藥效物質(zhì)研究

現(xiàn)代藥物學(xué)理論認(rèn)為中藥復(fù)方(除作用于腸道的藥物)活性成分吸收入血是發(fā)揮藥效的前提，而經(jīng)機(jī)體內(nèi)源性物質(zhì)與藥物及藥物與藥物間的相互作用下，部分中藥復(fù)方成分以非原型藥物發(fā)揮藥效。王喜軍于1997年首次正式提出以藥物化學(xué)為基礎(chǔ)、結(jié)合現(xiàn)代分離技術(shù)及多維聯(lián)用技術(shù)的“中藥血清藥物化學(xué)”，能夠?qū)ρ幸菩谐煞旨捌渌巹訉W(xué)進(jìn)行研究，闡釋了機(jī)體對藥物吸收、代謝的作用及藥物在體內(nèi)的相互作用，進(jìn)而揭示中藥復(fù)方配伍規(guī)律及其藥效物質(zhì)。

中藥復(fù)方血清藥物化學(xué)的研究過程分為:體內(nèi)樣品采集、制備、處理;特征指紋圖譜的建立;血中移行成分分析等。樣本主要來源于大鼠、豚鼠、家兔等與人類代謝行為相同或相似的物種的血清，通過正常動物藥物血清可進(jìn)行血中移行成分分析，結(jié)合模型動物體內(nèi)藥物變化可進(jìn)行藥效學(xué)研究;目前較常用的給藥方案有:①單次給藥法，即以較高濃度的劑量一次給藥;②多次給藥法，即短時間內(nèi)(3～5 h)多次給藥，給藥次數(shù)視實驗動物的耐受量而定，一般為2～3次;③連續(xù)給藥法，即每天給藥1～2次，連續(xù)給藥7～10 d。主要采血方式有肝門靜脈取血(含有復(fù)方原型成分和代謝產(chǎn)物，適用于初期研究)、腹主動脈取血(血中移行成分多為代謝產(chǎn)物，適用于后期研究)、眼眶后靜脈叢取血及尾靜脈取血(可多次取血，適用于長期研究)等;目前常用的分析技術(shù)有超高效液相色譜四極飛行時間質(zhì)譜法(UPLC-Q-TOF-MS)、液相色譜四極飛行時間質(zhì)譜(LC-Q-TOF-MS)、液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)、氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)等。部分中藥復(fù)方血清藥物化學(xué)相關(guān)研究見表2。

雖然血清藥物化學(xué)采用“中藥復(fù)雜化學(xué)成分-血中移行成分-體內(nèi)直接作用物質(zhì)-藥效物質(zhì)”的研究思路，能夠有效避免體外化學(xué)成分盲目分離造成的假陽性(藥物組分無法入血或代謝后滅活)或假陰性(藥物組分體內(nèi)代謝后產(chǎn)生活性)現(xiàn)象，但其研究仍具有一定的局限性:一是研究對象不全面，主要適用于吸收入血產(chǎn)生藥效的中藥復(fù)方;二是血清內(nèi)源性物質(zhì)復(fù)雜，藥物經(jīng)機(jī)體的吸收、代謝、排泄等過程，血中活性成分相對于其他內(nèi)源性物質(zhì)含量較少，不易于分析鑒定;三是中藥復(fù)方成分復(fù)雜，其不同的理化性質(zhì)使得其在體內(nèi)的藥動學(xué)不同，引起血清中藥物成分呈動態(tài)變化，導(dǎo)致實驗重現(xiàn)性差。

聲明：本文所用圖片、文字來源《中國藥學(xué)雜志》2019年7月，版權(quán)歸原作者所有。如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請與本網(wǎng)聯(lián)系

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