北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
(2)提取時(shí)間
稱(chēng)取0.20g槐米粉末6份,與16mL50%的乙醇混和,在提取溫度為90℃的條件下,提取不同時(shí)間,結(jié)果如圖3所示。由圖可知,隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)提取率逐漸增加,提取時(shí)間超過(guò)30min后,蘆丁的提取率趨于平穩(wěn)。這是由于溶劑熱法是在密閉的體系中進(jìn)行的,在加熱過(guò)程中溶劑產(chǎn)生的自生壓力,可以加快溶劑的滲透和溶質(zhì)的擴(kuò)散速率。因此,可以在短時(shí)間內(nèi),使細(xì)胞內(nèi)外有效成分的溶解擴(kuò)散達(dá)到平衡,從而提高提取效率。因此,本實(shí)驗(yàn)中的提取時(shí)間以30min為宜。
(3)提取溫度
稱(chēng)取0.2g干燥槐米粉末6份,與50%乙醇16mL混和,在不同的溫度下提取30min。結(jié)果如圖4所示。由圖4可知,40~70℃之間,蘆丁的提取率隨溫度的升高逐漸增加。提取溫度的升高,一方面加快了溶劑分子的擴(kuò)散速率和進(jìn)出細(xì)胞的交換速率,提高了溶劑的溶解能力;另一方面溫度的升高對(duì)提取體系內(nèi)的自生壓力產(chǎn)生了影響,溫度越高,自生壓力越大。植物細(xì)胞的細(xì)胞壁對(duì)細(xì)胞有著保護(hù)作用,細(xì)胞壁的破裂有助于內(nèi)容物的溶出,從而提高目標(biāo)物的提取率。同時(shí),壓力的升高有利于細(xì)胞壁的破裂,提高提取效率。提取溫度為70℃時(shí),蘆丁的提取率最高。超過(guò)此溫度后,蘆丁提取率開(kāi)始降低。這可能是由于溫度的升高一方面促使蛋白質(zhì)等生物大分子變性、凝固,阻礙了蘆丁從組織細(xì)胞內(nèi)向周?chē)崛∪軇┑臄U(kuò)散;另一方面體系內(nèi)自生壓力的升高,致使蘆丁在較高的溫度和壓力下,不能穩(wěn)定存在,發(fā)生分解,導(dǎo)致蘆丁的提取率降低。
按照不同的液料比稱(chēng)取槐米粉末6份,與16mL50%的乙醇溶液混合,70℃提取30min,結(jié)果如圖5所示。從圖中可以看出,適宜的液料比有效的增加了液料間的蘆丁濃度差,有利于物料與乙醇溶劑的充分接觸,提升蘆丁的提取率。但當(dāng)液料比超過(guò)100∶1時(shí),繼續(xù)增大液料比,蘆丁的提取率無(wú)顯著變化。因此選擇100∶1mL/g為最適合液料比。
3、響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果分析
(1)CentralComposite設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案及試驗(yàn)結(jié)果
采用DesignExpert8.0.6軟件設(shè)計(jì)試驗(yàn)條件,選用CentralComposite模型,對(duì)表2的結(jié)果進(jìn)行多元線性回歸擬合,得到乙醇體積分?jǐn)?shù)(A)、提取時(shí)間(B)、提取溫度(C)以及液料比(D)為自變量的四元二次方程:
Y=18.08+2.41A+0.97B+1.14C+0.84D+0.27AB-1.06AC-0.91AD+0.40BC-1.11BD+0.52CD-2.25A2-1.64B2-2.05C2-0.83D2。
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