北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
| 培養(yǎng)基 | DMEM-H完全培養(yǎng)基：90%DMEM-H+10%FBS |
| 傳代方法 | 復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中，迅速?zèng)]入 37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以 1 分鐘內(nèi)全部 溶解為宜；②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有 9ml 完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi)，1000-1200rpm/min 離心 5 分鐘，棄去 上清液，用 1-2mL 完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③然后將細(xì)胞懸液加入到含有 5-6mL 完全培養(yǎng)基的 T25 瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除，PBS 清洗兩遍后，加入 1-2mL 胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況， 在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，肉眼可見細(xì)胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù) 消化），直接吸掉胰酶，加入 5-6 毫升完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。③將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到 新的 T25 瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基 pH 值變化和細(xì)胞密度，定期換 液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%-90%時(shí)，重復(fù)傳代操作或者凍存。 |
| 生長(zhǎng)條件 | 培養(yǎng)溫度37℃；氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣； |
| 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
| 存儲(chǔ)條件 | 液氮 |
| 安全等級(jí) | 1 |
| 形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣，多角形，邊緣不規(guī)則，單層貼壁生長(zhǎng)，背景干凈 |
| 分離基物 | Hs578T細(xì)胞株源自乳房癌。它與正常成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞株Hs578Bst起源于同一位患者。Hs578T細(xì)胞株最初是多角形的，但在傳代過程中選擇并克隆了星形的細(xì)胞形態(tài)。電鏡下觀察到酪蛋白顆粒聚集，橋粒，緊密連接，脂質(zhì)體和光滑內(nèi)質(zhì)網(wǎng)小泡。與Hs578Bst一樣，未檢測(cè)到雌激素受體和內(nèi)生病毒。 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | Hs 578T是混合多邊形形態(tài)，其中星狀細(xì)胞類型被選擇用于在通道和克隆。 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書下載 | 說(shuō)明書文件 支原體檢測(cè)報(bào)告 |
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