北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
| 培養(yǎng)基 | 酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，NaCl：10.0，pH：7.0(25℃) |
| 傳代方法 | 1.溶解： 收到質(zhì)粒干粉后，請(qǐng)加入 20μl 無菌水至管底，溶解質(zhì)粒，室溫靜置 1min； 2.混合（吸附質(zhì)粒）： 200μl 感受態(tài)細(xì)胞 + 質(zhì)粒 DNA 5~10μl 混勻，冰上放置 30min； 3.熱激導(dǎo)入： 42℃靜置 90s； 4.收縮膜孔： 冰浴 2min； 5.修復(fù)培養(yǎng)： 毎管加 800μl LB 液體培養(yǎng)基，37 ℃培養(yǎng) 1h 150 r/min； 6.篩選培養(yǎng)： 將適當(dāng)體積（100 μl）的復(fù)蘇細(xì)胞，涂布在相應(yīng)抗性的 LB 平板上，正置平皿 30min（瓊脂面務(wù)必干燥后）， 倒置培養(yǎng) 12-16h，出現(xiàn)菌落。 7.提取： 挑取單克隆菌落至相應(yīng)抗性 LB 液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng) 12-16h，根據(jù)試驗(yàn)需要提取質(zhì)粒。 |
| 生長條件 | LB +氨芐青霉素，37℃（克隆菌株Stbl3,4180bp） |
| 存儲(chǔ)條件 | 2-8℃ |
| 安全等級(jí) | 0 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | pRSV-Rev是第三代慢病毒包裝輔助質(zhì)粒，載有病毒rev基因。 pRSV-Rev與pMDLg/pRRE（JY03035）和pMD2.G（JY03027）構(gòu)成第三代慢病毒包裝系統(tǒng)， 用于包裝第三代慢病毒載體質(zhì)粒，這4個(gè)質(zhì)粒組成四質(zhì)粒系統(tǒng)（即第三代慢病毒系統(tǒng)）。 將這4個(gè)質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染293T等細(xì)胞以包裝重組慢病毒，用此慢病毒感染目的細(xì)胞，即可實(shí)現(xiàn)基因敲除、敲降和過表達(dá)等。 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書下載 | 說明書文件 |
pVAX1
(pVAX1)
BNCC341621
pCMV-HA-Ub
(pCMV-HA-Ub)
BNCC356352
Stbl3（含LentiCRISPR V2質(zhì)粒）大腸桿菌
(Escherichia coli Stbl3（LentiCRISPR V2）)
BNCC359424
DH5ɑ（含pLVX-IRES-puro質(zhì)粒）大腸桿菌
(Escherichia coli DH5ɑ（pLVX-IRES-puro）)
BNCC364291
Lemo21(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
(Lemo21(DE3)Chemically Competent Cell)
BNCC384777
DH5α（含pCDNA3.1+質(zhì)粒）大腸桿菌
(Escherichia coli DH5α（pCDNA3.1+）)
BNCC365324
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