北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
| 培養(yǎng)基 | 酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，NaCl：10.0，pH：7.0(25℃) |
| 傳代方法 | 1.溶解： 收到質(zhì)粒干粉后，請(qǐng)加入 20μl 無(wú)菌水至管底，溶解質(zhì)粒，室溫靜置 1min； 2.混合（吸附質(zhì)粒）： 200μl 感受態(tài)細(xì)胞 + 質(zhì)粒 DNA 5~10μl 混勻，冰上放置 30min； 3.熱激導(dǎo)入： 42℃靜置 90s； 4.收縮膜孔： 冰浴 2min； 5.修復(fù)培養(yǎng)： 毎管加 800μl LB 液體培養(yǎng)基，37 ℃培養(yǎng) 1h 150 r/min； 6.篩選培養(yǎng)： 將適當(dāng)體積（100 μl）的復(fù)蘇細(xì)胞，涂布在相應(yīng)抗性的 LB 平板上，正置平皿 30min（瓊脂面務(wù)必干燥后）， 倒置培養(yǎng) 12-16h，出現(xiàn)菌落。 7.提?。? 挑取單克隆菌落至相應(yīng)抗性 LB 液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng) 12-16h，根據(jù)試驗(yàn)需要提取質(zhì)粒。 |
| 生長(zhǎng)條件 | LB +氨芐青霉素，37℃（克隆菌株DH5α，4856bp，啟動(dòng)子:PH） |
| 存儲(chǔ)條件 | 2-8℃ |
| 安全等級(jí) | 0 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | Bac-to-BacHTVectorKit設(shè)計(jì)用于在大腸桿菌(E.colil)中生成桿狀病毒載體后，在Sf9、 Sf21或HighFive細(xì)胞中表達(dá)和純化帶組氨酸標(biāo)簽的重組蛋白。 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書(shū)下載 | 說(shuō)明書(shū)文件 |
pVAX1
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(pCMV-HA-Ub)
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(Escherichia coli Stbl3（LentiCRISPR V2）)
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