北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
![pGL4.29[luc2P-CRE-Hygro]](https://beinabncc.oss-cn-beijing.aliyuncs.com/News/c4e80d2bbd4ac04f83ff6aa8ebbc91c9.jpg)
| 培養(yǎng)基 | 酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，NaCl：10.0，pH：7.0(25℃) |
| 傳代方法 | 1.溶解： 收到質(zhì)粒干粉后，請加入 20μl 無菌水至管底，溶解質(zhì)粒，室溫靜置 1min； 2.混合（吸附質(zhì)粒）： 200μl 感受態(tài)細(xì)胞 + 質(zhì)粒 DNA 5~10µl 混勻，冰上放置 30min； 3.熱激導(dǎo)入： 42℃靜置 90s； 4.收縮膜孔： 冰浴 2min； 5.修復(fù)培養(yǎng)： 毎管加 800µl LB 液體培養(yǎng)基，37 ℃培養(yǎng) 1h 150 r/min； 6.篩選培養(yǎng)： 將適當(dāng)體積（100 µl）的復(fù)蘇細(xì)胞，涂布在相應(yīng)抗性的 LB 平板上，正置平皿 30min（瓊脂面務(wù)必干燥后）， 倒置培養(yǎng) 12-16h，出現(xiàn)菌落。 7.提?。? 挑取單克隆菌落至相應(yīng)抗性 LB 液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng) 12-16h，根據(jù)試驗(yàn)需要提取質(zhì)粒。 |
| 生長條件 | LB +氨芐青霉素，37℃（克隆菌株DH5α，6084bp） |
| 存儲(chǔ)條件 | 2-8℃ |
| 安全等級 | 0 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro] 載體 （a–f） 包含一個(gè) cAMP 反應(yīng)元件 （CRE），可驅(qū)動(dòng)熒光素酶報(bào)告基因 luc2P （Photinus pyralis） 的轉(zhuǎn)錄。luc2P 是一種合成來源的熒光素酶序列，具有人源密碼子優(yōu)化功能，專為高表達(dá)和減少異常轉(zhuǎn)錄而設(shè)計(jì)。luc2P 基因包含 hPEST，一種蛋白質(zhì)不穩(wěn)定序列。誘導(dǎo)時(shí)，luc2P 編碼的蛋白質(zhì)比 luc2 基因編碼的蛋白質(zhì)反應(yīng)更快。載體骨架包含一個(gè)氨芐青霉素抗性基因，允許在大腸桿菌中進(jìn)行選擇，以及一個(gè)用于潮霉素抗性的哺乳動(dòng)物選擇標(biāo)記物。 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書下載 | 說明書文件 |
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