北方偉業(yè)計量集團有限公司
| 培養(yǎng)基 | 酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，NaCl：10.0，瓊脂：15.0，pH：7.0±0.1（25℃） |
| 傳代方法 | 1.Stbl3感受態(tài)細胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中），加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手撥打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。 2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。 3.向離心管中加入0.9 mL 室溫S.O.C. 培養(yǎng)基或LB培養(yǎng)基（推薦使用SOC培養(yǎng)基，可提高轉化效率）。 4.30℃，225 rpm復蘇90分鐘。（當質粒中含有不穩(wěn)定片段時， 30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率，若轉化controlPUC19計算轉化效率，則需37℃，225 rpm復蘇60分鐘。） 5.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 培養(yǎng)基上。 6.將平板倒置放于30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。（若轉化controlPUC19 計算轉化效率，則需37℃培養(yǎng)過夜） |
| 生長條件 | 37℃；18-24h；好氧 |
| 存儲條件 | -80℃ |
| 安全等級 | 1 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書下載 | 說明書文件 |
pVAX1
(pVAX1)
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pCMV-HA-Ub
(pCMV-HA-Ub)
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(Escherichia coli Stbl3（LentiCRISPR V2）)
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(Escherichia coli DH5ɑ（pLVX-IRES-puro）)
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(Lemo21(DE3)Chemically Competent Cell)
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