北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
| 培養(yǎng)基 | 酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，NaCl：10.0，瓊脂：15.0，氯霉素：50μg/mL，pH：7.0(25℃)（培養(yǎng)基滅菌冷卻至48℃時(shí)，加入Chl抗生素，使其最終含量為50μg/mL） |
| 傳代方法 | 1.感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化 (或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時(shí)迅 速插入冰中) ，加入目的 DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手撥打 EP 管底輕輕混勻，冰上靜置 25 分鐘。 2.42℃水浴熱激 45 秒，迅速放回冰上并靜置 2 分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。 3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基LB，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。 4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的LB培養(yǎng)基上。 5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少17h。 |
| 生長(zhǎng)條件 | 37℃；18-24h；好氧 |
| 存儲(chǔ)條件 | -80℃ |
| 安全等級(jí) | 0 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 蛋白表達(dá) |
| 共享方式 | 公益性共享 |
pVAX1
(pVAX1)
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pCMV-HA-Ub
(pCMV-HA-Ub)
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Stbl3（含LentiCRISPR V2質(zhì)粒）大腸桿菌
(Escherichia coli Stbl3（LentiCRISPR V2）)
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DH5ɑ（含pLVX-IRES-puro質(zhì)粒）大腸桿菌
(Escherichia coli DH5ɑ（pLVX-IRES-puro）)
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Lemo21(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
(Lemo21(DE3)Chemically Competent Cell)
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(Escherichia coli DH5α（pCDNA3.1+）)
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