2.3 統(tǒng)計分析方法比較

利用SIMCA14.1軟件對測定的大豆水溶性蛋白質δ¹³C、δ¹⁵N、δ¹⁸O和δ²H值進行多元變量統(tǒng)計分析，分別建立PCA和OPLS–DA兩種統(tǒng)計分析方法的大豆產(chǎn)地溯源鑒別模型，如圖5和圖6所示（橢圓形區(qū)域為HotellingT2檢驗，95%置信區(qū)間）。

PCA溯源鑒定模型結果顯示，利用大豆水溶性蛋白質中的δ¹³C、δ¹⁵N、δ¹⁸O和δ²H值可區(qū)分四個國家的大豆樣品。構建OPLS–DA大豆產(chǎn)地溯源鑒定模型獲得大豆中水溶性蛋白質的4個變量δ¹³C、δ¹⁵N、δ¹⁸O和δ²H對產(chǎn)地區(qū)分模型的貢獻度用VIP值評定。結果表明，δ¹⁵N在產(chǎn)地溯源模型中對產(chǎn)地溯源的貢獻最大，其次是δ²H和δ¹⁸O，δ¹³C的貢獻最低，其VIP值依次為1.069，1.045，1.035，0.834。對比分析大豆產(chǎn)地溯源的兩種統(tǒng)計分析方法的模型鑒定準確率，結果表明，OPLS–DA模型分析結果顯著，建立的識別模型對美國、巴西和阿根廷產(chǎn)大豆的識別準確率均為100%，對加拿大產(chǎn)大豆的識別準確率為90%；PCA識別模型對美國和阿根廷產(chǎn)大豆的識別準確率均為80%，對巴西和加拿大產(chǎn)大豆的識別準確率均為90%，因此最終選擇OPLS–DA統(tǒng)計方法建立的模型進行大豆產(chǎn)地溯源識別分析。

2.4 大豆產(chǎn)地鑒定模型建立

分別對美國與其它國家大豆水溶性蛋白質δ¹³C、δ¹⁵N、δ¹⁸O和δ²H值采用OPLS–DA建立兩兩國家同位素產(chǎn)地溯源鑒定模型，結果如圖7～圖9所示（橢圓形區(qū)域為HotellingT2檢驗，95%置信區(qū)間）。

圖7～圖9結果表明，所建立的同位素產(chǎn)地溯源鑒定模型識別準確率達到100%，應用該方法可準確鑒別美國與其他國家大豆產(chǎn)地。

2.5 大豆產(chǎn)地鑒定模型驗證

為了進一步驗證上述模型的可靠性，選用四個國家各10份非建模大豆樣品，提取其中的水溶性蛋白質，測定δ¹³C、δ¹⁵N、δ¹⁸O和δ²H值，分別帶入已建立的OPLS–DA兩兩國家識別模型進行驗證，結果見表2。盲樣驗證結果表明，除了加拿大產(chǎn)大豆中有1份被誤判為美國產(chǎn)外，其他3個國家盲樣均可準確識別，識別準確率為100%。

3 結語

建立了基于EA–IRMS測定大豆水溶性蛋白質δ¹³C、δ¹⁵N、δ¹⁸O和δ²H的OPLS–DA大豆產(chǎn)地溯源模型。結果表明，美國與加拿大、阿根廷、巴西產(chǎn)的大豆在建立的兩兩識別模型中可準確鑒別，識別準確率均可達100%。該方法和所構建的模型準確可靠，可有效防止和打擊特定國家的大豆通過第三國轉運出口至我國的非法行為，維護國家利益。

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