大腸菌群是用來(lái)評(píng)價(jià)食品衛(wèi)生狀況的指標(biāo)。為了確保檢驗(yàn)結(jié)果可信，試將測(cè)量不確定度的評(píng)定結(jié)果引入到生活飲用水中總大腸菌群測(cè)定能力驗(yàn)證考核工作中。

不確定度評(píng)定是表示被測(cè)量值的分散性與測(cè)量結(jié)果相關(guān)性的參數(shù)，是判斷測(cè)量結(jié)果質(zhì)量的重要依據(jù)，也是反映檢驗(yàn)過(guò)程中各因素對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果不確定度的影響程度，任何檢驗(yàn)（測(cè)）結(jié)果都不可避免因誤差而導(dǎo)致測(cè)定值的不確定度，國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)ISOdEC17025中明確規(guī)定檢測(cè)報(bào)告必須有檢測(cè)結(jié)果不確定度數(shù)據(jù)及說(shuō)明，尤其檢測(cè)結(jié)果處于臨界值時(shí)，必須出具包含不確定度的檢測(cè)報(bào)告。通過(guò)對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)不確定度評(píng)估，可以分析出檢測(cè)過(guò)程中哪些因素是重點(diǎn)關(guān)注的問(wèn)題，以便提高檢測(cè)能力，保證數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。
本文分析多管發(fā)酵法測(cè)定生活飲用水中總大腸菌群過(guò)程中引入不確定度的來(lái)源，比較各分量不確定度所占的比例，計(jì)算生活飲用水中總大腸菌群測(cè)定結(jié)果合成不確定度和擴(kuò)散不確定度，從而定量描述生活飲用水中總大腸菌群測(cè)定結(jié)果的不確定度。為類似大腸菌群測(cè)定結(jié)果不確定度的評(píng)定提供參考。

一、材料與方法

1、試驗(yàn)材料

生活飲用水：吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提供，螺旋管裝凍干粉，用加冰袋的密封盒取回實(shí)驗(yàn)室。

2、儀器與試劑

SW-CJ無(wú)菌操作臺(tái)：中國(guó)蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司；PRESOCLAVE-Ⅱ高壓滅菌器：西班牙SELECTA；DHP-9162恒溫培養(yǎng)箱：太倉(cāng)市科教器材廠；ABl35-S電子天平（±0.01g）：瑞士梅特勒-托利多公司。

3、試驗(yàn)方法

從4⁰C冰箱取出裝有凍干粉的螺旋管，于室溫下放置15min復(fù)溫。無(wú)菌操作向螺旋管中加入10mL0.85％無(wú)菌生理鹽水溶液進(jìn)行復(fù)溶，蓋好瓶蓋，室溫下靜置2min。使用均質(zhì)器充分混懸螺旋管中的內(nèi)容物，靜置30s以消除產(chǎn)生的泡沫。把菌液吸入無(wú)菌瓶中，再向螺旋管中加入10mL0.85％無(wú)菌生理鹽水沖洗螺旋管，把洗液液吸入無(wú)菌瓶中；重復(fù)上述沖洗螺旋管過(guò)程5次?？傁♂屢?0mL0.85％無(wú)菌生理鹽水（復(fù)溶10mL0.85％無(wú)菌生理鹽水+總稀釋液50mL0.85％無(wú)菌生理鹽水），振蕩混勻，做為原倍（100）樣品。

依據(jù)GB/T5750.12-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法微生物指標(biāo)（多管發(fā)酵法）》進(jìn)行檢驗(yàn)。

4、不確定度的主要來(lái)源

檢驗(yàn)結(jié)果不確定度的主要來(lái)源見圖1。

二、各不確定度分量的評(píng)定

1、樣品制備引入的不確定度評(píng)定

能力驗(yàn)證過(guò)程中，樣品制備是決定測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵因素。本實(shí)驗(yàn)樣品制備過(guò)程中主要由10mL刻度吸管分6次將樣品逐步洗出。JJG196-2006規(guī)定，10mL刻度吸管允許誤差為±0.05mL。均屬于B類評(píng)定，按矩形分布計(jì)算不確定度。因此，10mL刻度吸管引入的不確定度μ_{（10mL刻度吸管）}為：

2、樣品稀釋引入的不確定度評(píng)定

樣品稀釋過(guò)程不確定度來(lái)源主要是10mL刻度吸管和1mL移液器。JJG196-2006規(guī)定，10mL刻度吸管允許誤差為±0．05mL。JJG646—2006移液器檢定規(guī)程規(guī)定1000μL移液器吸取1mL時(shí)允許誤差為±1.0％，均屬于B類評(píng)定，按矩形分布計(jì)算不確定度。因此，10mL刻度吸管和1nlL移液器引入的不確定度μ_{（10mL刻度吸管）}和μ_{（1mL移液器）}分別為：

10mL刻度吸管和1mL移液器引入的相對(duì)不確定度μ_{（10mL刻度吸管）}和μ_{（1mL移液器）}分別為：

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